Die mobile Phase in der Umkehrphasen-HPLC: Auswahl, Selektivität und Fluidik
Termin: Mo, 04.05.2026
Dauer: 10:30 - 11:30
Referent: Guido Rimmel
Neben der Auswahl der richtigen HPLC-Säule ist die Optimierung der mobilen Phase der zweite Schlüsselparameter für eine erfolgreiche Methodenentwicklung in der Umkehrphasen-HPLC. Ihren Einfluss wollen wir in diesem Webinar etwas näher beleuchten.
Dabei beginnen wir zunächst mit der Auswahl eines geeigneten Puffersystems, abhängig von dem gewünschten pH-Wert und dem eingesetzten Detektor. Wir klären, wie man einen Puffer richtig ansetzt und warum sein Einsatz die Robustheit einer Methode steigert. Außerdem zeigen wir anhand von anschaulichen Beispielen, wie der pH-Wert die Selektivität der Chromatographie beeinflussen kann.
Im zweiten Teil vergleichen wir die Eigenschaften der gängigsten organischen Lösungsmittel für die Umkehrphasen-HPLC hinsichtlich Polarität, Elutionskraft und Kompatibilität mit dem Detektor. Auch die Änderung der Selektivität der Trennung, speziell für polare und aromatische Analyten, welche durch die unterschiedlichen chemische Struktur der Lösungsmittel hervorgerufen wird, wird diskutiert.
Abschließend gehen wir auf wichtige fluidische Eigenschaften eines Chromatographiesystems ein. Hierzu zählen die optimale Lineargeschwindigkeit zur Erreichung einer maximalen Trenneffizienz, der Rückdruck in Abhängigkeit von der Temperatur und der Zusammensetzung der mobilen Phase sowie das Totvolumen der Säule, welches je nach verwendetem Packungsmaterial variieren kann
Wichtige Lernziele:
• Wie der pH-Wert der mobilen Phase die Retention der Zielanalyten beeinflussen
• Typische organische Lösungsmittel für die Umkehrphasen-HPLC und Tipps für deren Einsatz
• Optimale Flussraten in Abhängigjeit von Säuleninnendurchmesser und Partikelgröße
Das Webinar richtet sich an
Routineanwender, die die Eignung ihrer verwendeten mobilen Phase überprüfen möchten sowie an Methodenentwickler, die nach Tipps und Tricks zur Verbesserung der chromatographischen Trennleistung suchen.
HILIC - die Dos and Don’ts: Wie man vermeidet, damit baden zu gehen
Termin: Di, 10.02.2026
Dauer: 10:30 - 11:45
Referent: Matthias Gläser, Senior Chromatography Solutions Specialist, Phenomenex
Die Umkehrphasen- oder Reversed-Phase Chromatographie (RP) ist die verbreitetste LC-Analysentechnik für organische Komponenten. Enthalten die zu analysierenden Gemische jedoch gleichzeitig stark hydrophile Analyten, kommen selbst erfahrene Chromatographeure an Ihre Grenzen. Solche Analyten „brechen durch“, koeluieren mit der Probenmatrix oder zeigen schlechte Peakformen. Verbreitet findet man solche Probleme bei der Analyse von Basen und Säuren, aber auch anderen polar funktionalisierten Kohlenwasserstoffen.
Zur besseren Retention und Quantifizierung von polaren Analyten in der LC besprechen wir in diesem Webinar die Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography, kurz HILIC. Wir werden jene Stolperfallen aufzeigen, die regelmäßig dazu führen, dass HILIC nach kurzer Euphorie in vielen Laboren doch schnell wieder verworfen wird. Anhand eines strukturierten HILIC – Methodenentwicklungsansatzes wird die praktische Umsetzung im Laboralltag, sowie deren Vorteile und Limitierungen im Vergleich zu den bisher besprochenen Techniken diskutiert.
Sie werden lernen:
• Die Vorteile von HILIC wie höhere MS-Empfindlichkeit, orthogonale Selektivität und höherer Probendurchsatz
• Auswahl der richtigen Säule und Optimierung der mobilen Phase
• Einsatz des HILIC-Modus für die Analyse von polaren Pestiziden oder ultrakurzkettigen PFAS
Das Webinar richtet sich an
Analytiker, die neu mit dem HILIC-Modus beginnen sowie an erfahrene Anwender, die ihre bestehende Methodik verbessern möchten.
SPE - Einführung in die Methodenentwicklung mit modernen Polymeren
Termin: Di, 08.07.2025
Dauer: 10:30 - 11:30
Referent: Dr. Bernd Thierfelder
Die Festphasenextraktion (SPE) hat sich in den vergangenen Jahrzehnten als effektive und leistungsstarke Probenvorbereitungsmethode etabliert. In vielen Bereichen, wie der Umwelt- und Lebensmittel- sowie der medizinischen und biopharmazeutischen Analytik, in denen mit sehr komplexen und gering konzentrierten Proben gearbeitet wird, leistet die Festphasenextraktion hervorragende Dienste in Bezug auf Anreicherung und Aufreinigung. Dies verbessert zum einen die Empfindlichkeit der nachfolgenden Analytik, zum anderen schont es die chromatographischen Trennsäulen und Systeme.
Ihre weite Verbreitung erlangte die Festphasenextraktion anfangs zunächst durch den Einsatz von reinen Silika-Materialien sowie modifizierten und oberflächenfunktionalisierten Silika-basierten Phasen wie C18, Ionenaustauscher, Amino usw.. Mit der Entwicklung Polymer-basierter SPE Sorbentien aus den vergangenen Jahren ist die Selektivitätsbreite im Bereich der RP- und Ionenaustausch-SPE stark erweitert worden. Folglich kommen diese für die neuere, moderne Methodenentwicklung zumeist bevorzugt gegenüber den Silika-basierten Sorbentien zum Einsatz. Mittlerweile sind zahllose Publikationen veröffentlicht, in denen diese Polymere in den verschiedensten analytischen Bereichen für die Festphasenextraktion schwieriger Proben verwendet werden.
Sie werden lernen:
• Einen grundlegenden Einblick in die Eigenschaften polymerbasierter SPE Sorbentien im Vergleich zu den silikabasierten Materialien.
• Welche Vorteile Polymermaterialien in der praktischen Handhabung bei den einzelnen SPE Schritten besitzen.
• Wie sich mit einem völlig neuartigen SPE-Polymer die Methodenentwicklung durch ein verkürztes Protokoll stark vereinfachen und einen erhöhten Aufreinigungsgrad erzielen.
Das Webinar richtet sich an:
Dieses Webinar richtet sich an alle Interessenten, die einen Einblick in die Grundlagen der SPE sowie in die allgemeinen Eigenschaften Polymer-basierter SPE Sorbentien erlangen möchten.
