Wskazówka techniczna GC
Poziom: Podstawy
Jakie parametry powinienem wziąć pod uwagę, wybierając kolumnę GC do mojej aplikacji?
1) Polarność – zazwyczaj producent kolumny GC podaje informacje dotyczące polarności, która jest zwykle określana za pomocą indeksów czasu retencji Kovatsa w połączeniu z liczbami McReynoldsa. Ogólna zasada mówi, że polarność fazy stacjonarnej powinna jak najbardziej odpowiadać polarności analitów, dlatego faza niepolarna, tak jak ZB-1 (oceniona jako 5 na skali polarności), byłaby dobrym wyborem do analizy węglowodorów, podczas gdy ZB-Wax (57 na skali polarności) jest często wybierana do analizy alkoholi.
2) Selektywność – kontrolowana jest przez różne grupy funkcyjne obecne w polimerowej fazie stacjonarnej, której bazą jest polisiloksan lub glikol polietylenowy. Fazy polisiloksanowe będą miały zazwyczaj grupy metylowe, fenylowe lub cyjanopropylove przyłączone do łańcuchów polisiloksanu, co umożliwia różnorodne interakcje:
• Grupy metylowe - siły van der Waalsa lub siły Londona,
• Grupy fenylowe - oddziaływania pi-pi,
• Grupy cyjanopropylove - oddziaływania pi-pi i dipol-dipol.
Zwiększenie zawartości grup fenylowych lub cyjanopropylowych w fazie stacjonarnej zwiększa polarność. Fazy na bazie glikolu polietylenowego (PEG) oferują miejsca do występowania interakcji dipol-dipol i wiązań wodorowych, fazy PEG są zazwyczaj jednymi z najbardziej polarnych dostępnych faz.
3) Długość – zwiększanie długości kolumny zwiększa liczbę półek teoretycznych, co zwiększa rozdzielczość, ale również wydłuża czas analizy. Kolumna o długości 30 m to zazwyczaj dobry punkt startowy do ogólnego rozwoju metody, podczas gdy kolumny o długości 60 m są często używane do analizy skomplikowanych mieszanin. Kolumny o długości 15 m są zazwyczaj stosowane, gdy wymagane jest szybkie rozdzielenie mniej skomplikowanych mieszanin.
4) Średnica wewnętrzna (ID) – Wybór średnicy kolumny wpływa zarówno na pojemność kolumny (ile analitu można zadozować), jak i na sprawność. Im mniejsza średnica wewnętrzna, tym wyższa sprawność, ale niższa pojemność. Dobre miejsce do rozpoczęcia rozwoju metody to kolumna o średnicy 0,25 mm, która stanowi dobry kompromis między sprawnością a pojemnością. Jeśli przenosisz metodę ze starej, pakowanej kolumny GC na kapilarną kolumnę GC, często wybiera się kolumny o średnicy 0,53 mm ze względu na ich większą pojemność względem analitów.
5) Grubość filmu – Cienkie warstwy zapewniają najwyższą sprawność, ale dają niższą retencję analitu. Grubsze warstwy mają większą pojemność, ale prowadzą do większego wymywania fazy przy wysokich temperaturach. Jeśli decydujesz się na użycie cienkiej warstwy (0,1 - 0,25 µm) a jednocześnie pracujesz a reaktywnymi związkami, preferowane jest wybranie kolumny, która jest silnie zdeaktywowana, aby zapobiec ogonowaniu pików. Takie kolumny zazwyczaj charakteryzują się również niższym wymywaniem fazy.
Phenomenex is a technology leader committed to developing novel analytical chemistry solutions that solve the separation and purification challenges of researchers worldwide.
CONNECT WITH US
