Astuce technique GC
Niveau : débutant
Quels sont les paramètres à prendre en compte lors de la
sélection d'une colonne GC ?
1) Polarité – le fabriquant de la colonne GC fournit généralement une indication sur la polarité. La valeur fournie est déterminée en utilisant les indices de rétention de Kovats ainsi que les constantes de McReynolds. En général, il est conseillé de choisir une phase strationnaire avec une polarité similaire à celle des analytes cibles. Ainsi une phase non polaire telle qu'une ZB-1 (notée 5 sur l'échelle de polarité) serait un bon choix pour l'analyse des hydrocarbures, tandis qu'une ZB-Wax (57 sur l'échelle de polarité) serait un bon choix pour l'analyse des alcools.
2) Sélectivité – elle est contrôlée par les différents groupes fonctionnels présents sur la phase stationnaire (polymérique), dont la base est soit le polysiloxane, soit le polyéthylène glycol. Les phases polysiloxanes ont généralement des groupes méthyle,
phényle ou cyanopropyle greffés aux chaînes de polysiloxane, ce qui permet d'obtenir différentes interactions :
• Groupes méthyliques – interactions de Van der Waals ou forces de London,
• Groupes phényles – interactions pi-pi,
• Groupes cyano – interactions pi-pi et dipôle-dipôle.
L'augmentation du pourcentage de substituants phényle ou cyanopropyle dans la phase stationnaire augmente la polarité. Les phases en polyéthylène glycol (PEG) offrent des sites pour les interactions dipôle-dipôle et les liaisons hydrogène. Il s'agit généralement des phases les plus polaires disponibles.
3) Longueur – Des colonnes plus longues augmentent le nombre de plateaux théoriques, ce qui augmente la résolution, mais également les temps d'analyse. Une colonne de 30 m est généralement un bon point de départ pour le développement de méthodes générales, tandis que les colonnes de 60 m sont généralement utilisées pour l'analyse d'empreintes de mélanges complexes. Les colonnes de 15 m sont généralement utilisées lors de la séparation rapide de mélanges moins complexes.
4) Diamètre interne – Le choix du diamètre interne (DI) de la colonne a un impact sur la capacité de la colonne (la quantité d'analyte que vous pouvez injecter) et sur l'efficacité. Plus le DI de la colonne est petit, plus l'efficacité est élevée, mais plus sa capacité est
faible. Un bon point de départ pour le développement de méthode est une colonne avec un DI de 0,25 mm, qui fournit un bon compromis entre efficacité et capacité. En cas de conversion d'une méthode GC utilisant une colonne remplie vers une méthode avec une colonne capillaire, les colonnes avec un DI de 0,53 mm sont souvent choisies en raison de leur capacité plus élevée.
5) Épaisseur de film – Les colonnes à film fin offrent la meilleure efficacité mais avec une rétention plus faible. Les films plus épais ont une capacité plus élevée mais entraînent plus de perte de phase stationnaire à haute température. Lors de l'analyse de composés actif avec une colonne possédant un film fin (0,1 - 0,25 µm), il est préférable de sélectionner une colonne fortement désactivée pour éviter une trainée de pics. Ces colonnes fournissent généralement aussi moins de perte de phase.
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