Astuces techniques sur la préparation d’échantillon
Niveau : débutant
Méthode SPE générique en fonction du mécanisme de rétention
A chaque mécanisme/phase SPE correspond un ensemble de conditions de solvant qui permettent d´effectuer le traitement SPE. Utilisez les solvants/les conditions de pH énumérées ci-dessous ; les volumes sont déterminés dans la Sélection des volumes de solvant et de la méthode.
Méthode SPE en phase inverse
| Sorbant | SDB-L, C18, C8, PH, CN, X, XL | |
|---|---|---|
| Propriétés de l´analyte | Polarité de faible à modérée (ou non polaire) Hydrophobe Neutralisé / non chargé | Produits pharmaceutiques, Pesticides, herbicides |
| Échantillon/matrice | Aqueux, dilué avec du tampon | Fluides biologiques, Eau |
| Étape de conditionnement | 1. Solvatation - solvants organiques polaires 2. Equilibrage - Aqueux, tampons |
1. Méthanol 2. Eau ou tampon |
| Étape de lavage | Tampon aqueux avec de 5 à 50% de solvant organique polaire | Méthanol: Eau (5:95) |
| Étape d´élution | Solvant(s) organique(s) polaire(s) ou non polaire(s) avec ou sans eau, tampon et / ou Acide ou base fort(e) | Méthanol: Acétonitrile (50:50) |
Méthode SPE en phase normale
| Sorbant | Silica, Florisil®, NH2, CN | |
|---|---|---|
| Propriétés de l´analyte | Composés de polarité modérée à élevée (neutralisés /non chargés) | Pesticides |
| Échantillon/matrice | Solvants organiques non polaires ou solvants organiques modérément polaires | Hexane, chloroforme, éther de pétrole, toluène ou dichlorométhane |
| Étape de conditionnement | 1. Solvatation - solvants organiques polaires (facultatif) 2. Equilibrage - Solvant de l´échantillon/de la matrice |
1. Méthanol (facultatif) 2. Hexane ou chloroforme |
| Étape de lavage | Solvants organiques non polaires avec une faible concentration (1 à 5%) de solvants organiques de polarité modérée à faible | Hexane avec 1 % de THF, d´acétate d'éthyle, d'acétone, d'acétonitrile ou d'IPA |
| Étape d´élution | Solvants organiques non polaires avec une concentration élevée (5 à 50%) de solvants organiques de polarité modérée à faible | Hexane with 10 % THF, ethyl acetate, acetone, acetonitrile or IPA |
Méthode SPE échange fort d’ions
| Sorbant | Échange d'anions: Screen-A, SAX, X-A, X-AW, XL-A, XL-AW Échange de cations: Screen-C, SCX, X-C, X-CW, XL-C, XL-CW |
|
|---|---|---|
| Propriétés de l´analyte | Composés ionisées/chargés | Échange d'anions: analytes acides Échange de cations: médicaments basiques |
| Échantillon/matrice | Aqueux ; tampons de faible force ionique, (<30 mM), pH ajusté | Fluides biologiques avec un tampon |
| Étape de conditionnement | 1. Conditionnement - solvants organiques polaires 2. Équilibrage - tampons de faible force ionique, pH ajusté |
1. Méthanol 2. 25 mM Tris-OAc, pH 7 |
| Étape de lavage | Tampons aqueux de concentration en sel faible, avec ou sans solvant organique | Échange d'anions: Tampon pH 7: Méthanol (50:50) Échange de cations: 1. Tampon pH 6 2. 1 M d'acide acétique 3. Méthanol |
| Étape d´élution | • Neutraliser la charge sur le cation ou l’anion faible • Augmenter la force ionique et la concentration du contre-ion • Ajouter un contre-ion fort |
Échange d´anions : Hexane: acétate d'éthyle (75:25) + 1% d'acide acétique glacial Échange de cations: Méthanol + 5% de NH3 |
NOTE: Ce sont des conditions générales de départ. Veuillez contacter votre ingénieur support technique chez Phenomenex pour plus d'assistance
Headquarters
411 Madrid Avenue, Torrance, CA 90501
t: (310) 212-0555 f: (310) 328-7768
Stay up to date on the latest from Phenomenex
Site Map Terms and Conditions of Sale Privacy Statement Quality Policy Site Terms of Use Trademarks California Supply Chains Act Impressum © 2024 Phenomenex Inc. All rights reserved.