Jeżeli pracujesz ze znaną, sprawdzoną metodą, chcielibyśmy zaproponować następujące rozwiązania:
- Sprawdź swoją metodę SPE, aby upewnić się, że żaden krok nie został pominięty.
- Rozważ uważnie cały proces. Czy przykładowo przepływ nie był zbyt wysoki podczas nakładania próbki lub jej elucji? Czy kolumienki SPE zdążyły wyschnąć pomiędzy etapem równoważenia i nakładania próbki?
Generalnie najszybszym rozwiązaniem jest powtórzenie procesu ekstrakcji pod warunkiem zadbania o powyższe punkty.
Jeśli jednak opracowujesz nową metodę, konieczne będzie „przemyślenie” swojego analitu. Pierwszą rzeczą, którą zalecamy, jest sporządzenie roztworu analitu bez matrycy próbki (do wykorzystania jako próbka idealna). Następnie przejdź przez przykładową metodę:
- Kondycjonowanie kolumienki;
- Równoważenie kolumienki;
- Nałożenie próbki i zebranie frakcji. Jeżeli analit został znaleziony we frakcji użytej do podawania próbki, sugerowałoby to że:
- Rozpuszczalnik próbki jest zbyt silny lub stosowane pH jest nieodpowiednie.
- Nakładanie próbki jest zbyt szybkie.
- Zastanów się, czy kolumienka nie została przeładowana lub czy masa sorbentu nie była za niska.
Jeżeli analit nie został znaleziony we frakcji użytej do podawania próbki, przejdź do etapu przemywania.
- Przemywaj kolumienkę, zachowując frakcję. Ponownie, przeanalizuj zawartość analitu. Jeżeli analit został znaleziony we frakcji użytej do przemywania, sugerowałoby to że:
- Rozpuszczalnik przemywający jest zbyt silny.
- Rozpuszczalnik przemywający ma nieodpowiednie pH.
- Jeżeli analit nie został znaleziony we frakcji z etapu nakładania lub przemywania próbki oznacza to, że analit pozostał w kolumience.
- Spróbuj zastosować silniejszy rozpuszczalnik do elucji analitu.
- Zastosuj rozpuszczalnik o odpowiednim pH.
- Jeżeli dwie pierwsze sugestie nie rozwiązują Twojego problemu, spróbuj zastosować mniej retencyjny sorbent (w odwróconym układzie faz, spróbuj zmienić kolumienki C18 na C8, jeżeli anality wykazują bardzo hydrofobowy charakter.
