Si está siguiendo un procedimiento que sabe que funciona le recomendamos lo siguiente:
- Compruebe todas las soluciones utilizadas para el método de SPE para asegurarse de que no hay ninguna mal etiquetada, etc.
- Considere el proceso, ¿podría ser que el flujo fuese potencialmente demasiado rápido durante la carga o la elución? ¿Podría ser que los cartuchos se hayan secado entre el acondicionamiento y la carga de la muestra?
Normalmente lo más rápido es volver a repetir la extracción prestando especial atención a estos puntos.
No obstante, si está desarrollando un método nuevo, será necesario que 'trace' su analito. Lo primero que le recomendamos es que haga una solución del analito sin matriz (para utilizarla como muestra ideal) antes de centrarnos en el método en sí:
- Acondicionar el cartucho
- Equilibrar el cartucho
- Cargar la muestra recolectando la fracción del líquido eluído para analizarlo y ver si hay analito en él. Si hay analito en esta fracción probablemente:
- El disolvente de la muestra es demasiado fuerte o el pH es incorrecto
- El flujo de carga de la muestra es demasiado alto
- Debe indagar si la cantidad de muestra es demasiado alta o si la cantidad de relleno es demasiado baja.
Si no hay analito en la fracción de la carga, pase al paso de la limpieza.
- Limpie el cartucho colectando la fracción del lavado. De nuevo, analícela para ver si contiene analito. Si hay analito en esta fracción probablemente:
- El disolvente de limpieza es demasiado fuerte
- El disolvente de limpieza no tiene el pH apropiado
- Si no hay analito en la fracción de carga ni en la de lavado entonces el analito debe estar retenido en el cartucho..
- Intente utilizar un disolvente de elución más fuerte
- Compruebe que el pH del disolvente de elución es apropiado
- Si las dos primeras opciones no ayudan, intente utilizar un relleno menos retentivo (en fase reversa, intente pasar de un cartucho C18 a uno C8 si los analitos son muy hidrofóbicos).
