Pokud pracujete se známou a dobrou metodou, doporučujeme Vám:
- Zkontrolujte všechny roztoky použité v SPE metodě, abyste se ujistili, že nic nebylo špatně označeno atd.
- Zvažte celý proces, byl průtok potenciálně příliš rychlý během plnění nebo eluce? Mohlo dojít k vysušení náplně mezi ekvilibrací a nanesením vzorku?
Obecně je nejrychlejší jednoduše opakovat extrakci a dbát na tyto body.
Pokud však vyvíjíte novou metodu, bude nutné váš analyt „vystopovat“. První věc, kterou bychom doporučili, je připravit roztok analytu bez matrice vzorku (pro použití jako ideální vzorek). Poté postupujte podle vzorové metody:
- Kondicinace
- Ekvilibrace
- Naneste vzorek a proteklý vzorek zachyťte. Analyzujte tento vzorek na obsah analytu. Pokud je analyt nalezen v této frakci, naznačuje to:
- Rozpouštědlo vzorku je příliš silné nebo je pH nesprávné
- Rychlost nanášení je příliš vysoká
- Došlo k průlomu, protože buď je zatížení vzorku příliš vysoké, nebo hmotnost sorbentu je příliš nízká.
Pokud analyt v nanášené frakci není nalezen, pokračujte krokem promývání.
- Vymyjte kolonku a uchovejte promývací frakci. Opět analyzujte obsah analytu. Pokud je analyt nalezen v promývací frakci, znamená to:
- Promývací rozpouštědlo je příliš silné
- Promývací rozpouštědlo nemá správné pH
- Pokud analyt nebyl nalezen v nanášecích nebo promývacích frakcích, musí být analyt zadržen v cartidgi.
- Zkuste použít silnější eluční rozpouštědlo
- Ujistěte se, že pH elučního rozpouštědla je správné
- Pokud první 2 návrhy nepomohou, zkuste použít méně retenční sorbent (v reverzní fázi, zkuste vyměnit sorbent C18 za sorbent C8, pokud jsou analyty velmi hydrofobní).
