Technischer Tipp zur Probenvorbereitung

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Niveau: Grundlagen

Generische SPE-Methode nach Retentionsmechanismus

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Jeder SPE-Mechanismus bzw. jede SPE-Phase hat eineallgemeinen Methode an Lösungsmittelbedingungen, unter denen die SPE betrieben werden kann. Verwenden Sie die unten aufgeführten Lösungsmittel und pH-Bedingungen sowie die Volumina, die Sie in der Sektion zur Auswahl der Methode und Volumina ermittelt haben.

Reversed Phase SPE Methode

Sorbens	SDB-L, C18, C8, PH, CN, X, XL
Eigenschaften des Analyten	Geringe bis moderate Polarität (oder unpolar) Hydrophob Neutral/ungeladen	Pharmazeutika, Pestizide, Herbizide
Probe/Matrix	Wässrig, mit Puffer verdünnt	Biologische Flüssigkeiten, Wasser
Konditionierungsschritt	Solvatisierung – polar organische Lösungsmittel Äquilibrierung – wässrig, Puffer	Methanol Wasser oder Puffer
Waschschritt	Wässrige Puffer mit 5 bis 50 % polar organischem Lösungsmittel	Methanol: Wasser (5:95)
Elutionsschritt	Polare(s) oder unpolare(s) organische(s) Lösungsmittel mit oder ohne Wasser, Puffer und/oder starker Säure oder Base	Methanol: Acetonitril (50:50)

Normalphasen SPE Methode

Sorbens	Silica, Florisil®, NH2, CN
Eigenschaften des Analyten	Verbindungen mit moderater bis starker Polarität (neutralisiert/ungeladen)	Pestizide
Probe/Matrix	Unpolare oder moderat polare organische Lösungsmittel	Hexan, Chloroform, Petrolether, Toluol oder Methylenchloride
Konditionierungsschritt	Solvatisierung – polare organische Lösungsmittel (optional) Äquilibrierung – Lösungsmittel der Probe/Matrix	Methanol (optional) Hexan oder Chloroform
Waschschritt	Unpolare organische Lösungsmittel mit einem geringen Anteil (1 bis 5 %) eines schwach bis moderat polaren organischen Lösungsmittels	Hexan mit 1 % THF, Ethylacetat, Aceton, Acetonitril oder IPA
Elutionsschritt	Unpolare organische Lösungsmittel mit einem größeren Anteil (5 bis 50 %) eines moderat bis stark polaren organischen Lösungsmittels	Hexan mit 10 % THF, Ethylacetat, Aceton oder IPA

Starke Ionenaustausch SPE Methode

Sorbens	Anionenaustausch: Screen-A, SAX, X-A, X-AW, XL-A, XL-AW Kationenaustausch: Screen-C, SCX, X-C, X-CW, XL-C, XL-CW
Eigenschaften des Analyten	Ionisierte/geladene Verbindungen	Anionenaustausch: Saure Analyten Kationenaustausch: Basische Verbindungen
Probe/Matrix	Wässrig; Puffer mit geringer Ionenstärke (<30 mM), pH eingestellt	Biologische Flüssigkeiten plus Puffer
Konditionierungsschritt	Konditionierung – polar organische Lösungsmittel Äquilibrierung – Puffer mit geringer Ionenstärke, pH eingestellt	Methanol 25 mM Tris-OAc, pH 7
Waschschritt	Wässrige Puffer mit geringen Salzkonzentrationen mit oder ohne organischem Lösungsmittel	Anionenaustausch: Puffer pH 7: Methanol (50:50) Kationenaustausch: Puffer pH 6 1 M Essigsäure Methanol
Elutionsschritt	Neutralisieren der Ladung des schwachen Anions oder Kations Erhöhen der Ionenstärke und Konzentration des Gegenions Hinzufügen eines starken Gegenionen-Verdrängers	Anionenaustausch: Hexan: Ethylacetat (75:25) +1 % Eisessig Kationenaustausch: Methanol + 5 % NH3

HINWEIS: Dies sind allgemeine Startbedingungen. Bitte kontaktieren Sie Ihren technischen Kundenberater von Phenomenex für weitere Unterstützung.

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