Suggerimento Tecnico per la Preparazione del Campione

Suggerimento Tecnico per la Preparazione del Campione

Livello: Base

Metodi SPE e Meccanismi di ritenzione

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Ogni meccanismo di ritenzione o fase SPE ha una specifica serie di condizioni e solventi. Si consiglia di utilizzare le condizioni di solvente/pH elencate di seguito, i volumi di lavaggio ed eluizione scelti in base al sorbente.

Metodi a Fase inversa

Sorbente	SDB-L, C18, C8, PH, CN, X, XL
Caratteristiche degli analiti	Bassa o lieve polarità, Idrofobici e non carichi	Pesticidi, erbicidi e farmaci
Campione/Matrice	Acquosi, diluiti in buffer	Fluidi biologici, acqua
Step di condizionamento	Solvatazione - solventi organici polari Equilibrazione - acquosi, buffer	Metanolo Acqua o Buffer
Step di lavaggio	Tamponi acquosi con una percentuale di organico dal 5 al 50%.	Metanolo: Acqua (5:95)
Step di eluizione	Solventi polari e non polari in presenza o assenza di acqua, acidi o basi forti	Metanolo: Acetonitrile (50:50)

Metodi in Fase Normale

Sorbente	Silica, Florisil®, NH2, CN
Caratteristiche degli analiti	Composti moderatamente o fortemente polari (neutri/non carichi)	Pesticidi
Campione/Matrice	Solventi organici non polari o solventi organici moderatamente polari	Esano, cloroformio, etere di petrolio, toluene o cloruro di metilene
Step di condizionamento	Solvatazione – solventi organici polari (opzionale) Equilibrazione – solvente - campione/matrice	Metanolo (opzionale) Esano o cloroformio
Step di lavaggio	Solventi organici non polari con una bassa concentrazione (dall'1 al 5 %) di solvente organico di polarità da moderata a bassa	Esano con 1 % di THF, acetato di etile, acetone, acetonitrile o alcool isopropilico)
Step di eluizione	Solventi organici non polari contenenti concentrazioni più elevate (dal 5 al 50 %) di solventi organici di polarità da moderata ad alta	Esano con 10 % di THF, acetato di etile, acetone, acetonitrile o IPA

Metodo SPE a scambio ionico forte

Sorbente	Scambio anionico: Screen-A, SAX, X-A, X-AW, XL-A, XL-AW Scambio Cationico: Screen-C, SCX, X-C, X-CW, XL-C, XL-CW
Caratteristiche degli analiti	Composti ionizzabili/carichi	Scambio anionico: composti acidi Scambio cationico: composti basici
Campione/Matrice	Acquoso; Tamponi a bassa forza ionica (< 30 mM),	Fluidi biologici più tampone
Step di condizionamento	Condizionamento – solventi organici polari Equilibrazione – tamponi a bassa forza ionica	Metanolo 25 mM Tris-OAc, pH 7
Step di lavaggio	Tamponi acquosi a bassa concentrazione salina con o senza solvente organico	Scambio anionico: Tampone pH 7: Metanolo (50:50) Scambio cationico: Tampone pH 6 1 M acido acetico Metanolo
Step di eluizione	Neutralizzare la carica sull'anione o sul catione debole Aumentare la forza ionica per competere con il controione Aggiungere un controione (ion displacement)	Scambio anionico: acietonitrile: acqua (75:25) +1 % acido acetico glaciale Scambio cationico: Metanolo + 5 % NH3

NOTA: Queste sono le condizioni generali di partenza. Si prega di contattare il proprio consulente tecnico Phenomenex per ulteriore assistenza.

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