Polisacharydowe chiralne fazy stacjonarne mają szerokie zastosowanie w rozdzielaniu enancjomerów. Stosowanie polisacharydowych faz stacjonarnych niesie ze sobą wiele korzyści, które obejmują szerokie rozpoznawanie chiralne poprzez liczne centra chiralne znajdujące się w cząsteczkach cukrów tworzących wymienione fazy stacjonarne. Z cząsteczkami cukru związane są selektory chiralne, które zapewniają lepsze rozpoznawanie niż w przypadku innych, chiralnych faz stacjonarnych o innej naturze.
Fazy polisacharydowe oferują dobrą elastyczność ze względu na to, że istnieje możliwość użycia fazy normalnej, polarnej organicznej, fazy odwróconej i SFC, a wszystko to przy użyciu pojedynczej kolumny chiralnej. Fazy stacjonarne są mocne i wytrzymałe oraz oferują dobrą ładowność, ponieważ są oparte na krzemionce.
Polisacharydowy selektor chiralny może być powlekany lub unieruchomiony na cząsteczce krzemionki, co może mieć wpływ na selektywność - bezpośrednio poprzez zmiany interakcji z fazą lub pośrednio poprzez zastosowanie różnych rozpuszczalników dostępnych w przypadku fazy unieruchomionej zamiast powlekanej.
Większość polisacharydowych chiralnych faz stacjonarnych jest powlekana. Oznacza to, że faza stacjonarna nie jest kowalencyjnie związana z podłożem krzemionkowym. Wiele selektorów chiralnych w ostatnich latach zostało unieruchomionych na cząsteczce krzemionki, co oznacza, że są one połączone kowalencyjnie i zapewniają większą stabilność w szerszym zakresie bardziej agresywnych rozpuszczalników. Możliwość stosowania rozszerzonego zakresu rozpuszczalników zwiększyła opcje selektywności dla tego typu chiralnych selektorów. Poniżej przedstawiono kilka wskazówek, jak zmaksymalizować chiralną selektywność przy użyciu unieruchomionych polisacharydowych chiralnych faz stacjonarnych.
Z fazą unieruchomioną masz do dyspozycji szerszy zakres rozpuszczalników organicznych wykorzystywanych podczas opracowywania metody, co może pozwolić Ci na rozdzielenie problematycznych enancjomerów poprzez pracę z silniejszymi rozpuszczalnikami organicznymi.
W tym przypadku rozdzielczość dla ornidazolu jest osiągana na unieruchomionej fazie Cellulose-5 wraz z wprowadzeniem MtBe do fazy ruchomej. Ta kombinacja wykazuje większą rozdzielczość w porównaniu z powlekaną fazą Cellulose-1.
| Chiralne rozdzielanie ornidazolu na Lux 5 µm i-Celluslose-5 | |||
|---|---|---|---|
| Kolumna | Lux 5µm i-Cellulose-5, LC Column, ea. | ||
| Wymiary | 250 x 4,6 mm ID | ||
| Nr katalogowy | 00G-4756-E0 | ||
| Typ elucji | Izokratyczny | ||
| Eluent A | 0,1% etyloamina w MtBE | ||
| Szybkość przepływu | 1 mL/min | ||
| Temp. kolumny | temp. otoczenia | ||
| Detekcja | UV-Vis Abs.-Variable Wave. (UV) @ 254 nm (warunki normalne) | ||
| Ornidazol na Lux 5 µm Cellulose-1 w NP | |||
|---|---|---|---|
| Kolumna | Lux 5µm Cellulose-1, LC Column, ea. | ||
| Wymiary | 250 x 4,6 mm ID | ||
| Nr katalogowy | 00G-4459-E0 | ||
| Typ elucji | Izokratyczny | ||
| Eluent A | Heksan / EtOH (80:20) DEA (0.1%) | ||
| Szybkość przepływu | 1 mL/min | ||
| Temp. kolumny | temp. otoczenia | ||
| Detekcja | UV-Vis Abs.-Variable Wave. (UV) @ 220 nm (warunki normalne) | ||
Nastrzykiwanie za pomocą silnych rozpuszczalników organicznych:
Wiele aplikacji wymaga zastosowania silnego rozpuszczalnika organicznego do nastrzyku - w przypadku powlekanej fazy może to prowadzić do rozpuszczenia fazy stacjonarnej i utraty selektywności. W przypadku zastosowania faz unieruchomionych nie zaobserwowano zmian w rozdzielczości, nawet przy użyciu rozpuszczalnika DMSO.
| Warunki dla wszystkich kolumn | |||
|---|---|---|---|
| Kolumna | Lux 5µm i-Cellulose-5 | ||
| Wymiary | 250 x 4,6 mm ID | ||
| Nr katalogowy | 00G-4756-E0 | ||
| Faza ruchoma | Metanol/DEA (100:0.1) | ||
| Szybkość przepływu | 1,5 mL/min | ||
| Detekcja | UV @ 280 nm | ||
| Temperatura | 27°C | ||
| Próbka | Laudanozyna (N-metylotetrahydropapaweryna) | ||
| Rozpuszczalnik do rozcieńczania | Dimetylosulfotlenek (DMSO) | ||
Podsumowując; z polisacharydowymi chiralnymi fazami stacjonarnymi masz do dyspozycji szeroki zakres rozpoznawania chiralnego i ogromną zmienność układów faz ruchomych i selektywności. Właśnie to może pomóc Ci w zapewnieniu dobrej rozdzielczości enancjomerycznej dla prawie wszystkich chiralnych cząsteczek, gdy przeprowadzany jest metodyczny i dokładny proces przesiewowy (ang. screening).
