Las fases estacionarias de polisacáridos se utilizan ampliamente en las separaciones enantioméricas. El uso de una fase estacionaria de polisacáridos presenta numerosas ventajas, entre las que se incluye el amplio reconocimiento quiral que ofrecen, derivado de los numerosos sitios quirales que se encuentran en la molécula de azúcar utilizada para formar la fase estacionaria. A estas moléculas de azúcar se une el selector quiral y es esto lo que ofrece un mayor reconocimiento quiral en comparación con las fases estacionarias quirales de diferente naturaleza
Las fases de polisacáridos ofrecen una buena flexibilidad en cuanto al tipo de fase móvil con la que se pueden emplear y permiten al usuario utilizar los modos de fase normal, orgánica polar, fase reversa y SFC, todo ello con una sola columna quiral. Las fases estacionarias son fuertes y robustas y ofrecen una buena capacidad de carga al estar basadas en sílice.
El selector quiral basado en polisacáridos puede venir solo cubriendo o bien inmovilizado sobre la partícula de sílice y esto puede afectar a la selectividad, ya sea directamente a través de un cambio en la interacción con la fase o indirectamente a través del uso de diferentes disolventes disponibles cuando se utiliza una fase inmovilizada en lugar de una fase recubierta.
La mayoría de las fases estacionarias quirales basadas en polisacáridos están recubiertas, lo que significa que la fase estacionaria no está unida covalentemente a la sílice subyacente. En los últimos años, varios selectores quirales se han inmovilizado a la partícula de sílice, lo que significa que están unidos covalentemente e infieren una mayor estabilidad en una gama más amplia de disolventes más agresivos. La capacidad de utilizar una gama más amplia de disolventes ha aumentado las opciones de selectividad de estos selectores quirales y a continuación damos algunos consejos sobre cómo maximizar la selectividad quiral utilizando fases estacionarias de polisacáridos inmovilizados.
Con una fase inmovilizada se permite una gama más amplia de disolventes orgánicos durante el desarrollo del método, lo que puede permitirle resolver enantiómeros notoriamente problemáticos trabajando con disolventes orgánicos más fuertes.
Aquí se consigue la resolución a línea base del Ornidazol en la fase inmovilizada de Celulosa-5 introduciendo MtBe en la fase móvil y esta combinación muestra una mayor resolución en comparación con la fase recubierta de Celulosa-1.
| Separación quiral del ornidazol en Lux 5 µm i-Celulosa-5 | |||
|---|---|---|---|
| Columna | Lux 5 µm i-Celluslose-5 | ||
| Dimensiones | 250 x 4.6 mm ID | ||
| Ref. de pedido | 00G-4756-E0 | ||
| Tipo de elución | Isocrático | ||
| Eluyente A | 0.1% Etilamina en MtBE | ||
| Flujo | 1 mL/min | ||
| Temperatura de columna | ambiente | ||
| Detección | UV-Vis Abs. (UV) @ 254 nm (ambiente) | ||
| Ornidazol en Celulosa-1 Lux 5 µm en NP | |||
|---|---|---|---|
| Columna | Lux 5µm Celulosa-1, Columna LC | ||
| Dimensiones | 250 x 4.6 mm ID | ||
| Ref. de pedido | 00G-4459-E0 | ||
| Tipo de elución | Isocrático | ||
| Eluyente A | Hexano / etOH (80:20) DEA (0.1%) | ||
| Flujo | 1 mL/min | ||
| Temperatura de columna | ambiente | ||
| Detección | UV-Vis Abs. (UV) @ 220 nm (ambiente) | ||
Inyección con disolventes orgánicos fuertes Muchas aplicaciones requieren el uso de un disolvente orgánico fuerte para la inyección - con una fase recubierta estos pueden llevar a la disolución de la fase estacionaria y a la pérdida de selectividad. Con una fase inmovilizada no se produce ningún daño y la selectividad se mantiene durante toda la vida útil de la columna. En este caso no se observa ningún cambio en la resolución cuando se utiliza una fase inmovilizada, incluso con un disolvente de inyección DMSO.
| Condiciones para todas las columnas | |||
|---|---|---|---|
| Columna | Columna Lux 5µm i-Celulosa-5 | ||
| Dimensiones | 250 x 4.6 mm ID | ||
| Ref. de pedido | 00G-4756-E0 | ||
| Fase móvil | Metanol/DEA (100:0.1) | ||
| Flujo | 1.5 mL/min | ||
| Detección | UV @ 280 nm | ||
| Temperatura | 27 C | ||
| Muestra | Laudanosina | ||
| Disolvente de dilución | Dimetilsulfóxido (DMSO) | ||
En resumen, con las fases estacionarias de polisacáridos se dispone de un amplio reconocimiento quiral y vastas permutaciones de sistemas de fase móvil y selectividad. Esto puede ayudar a garantizar una buena resolución enantiomérica para casi todas las moléculas quirales cuando se realiza un proceso de selección metódico y exhaustivo. Ahorre dinero en consumibles de LC, GC y preparación de muestras.
