Polysacharidové chirální stacionární fáze jsou široce používány v enantiomerních separacích. Použití polysacharidové stacionární fáze má řadu výhod, které zahrnují široké chirální rozpoznávání, vycházející z mnoha chirálních míst nalezených v molekule cukru použité k vytvoření stacionární fáze. Na tyto molekuly cukru je navázán chirální selektor a právě ten nabízí větší chirální rozpoznávání oproti chirálním stacionárním fázím jiné povahy.
Polysacharidové fáze nabízejí dobrou flexibilitu, pokud jde o typ mobilní fáze, se kterou můžete pracovat. Umožňují uživateli používat režimy normální fáze, polární organické fáze, reverzní fáze a SFC. Vše s jedinou chirální kolonou. Stacionární fáze jsou silné a robustní a nabízejí dobrou zatížitelnost, protože jsou na bázi siliky.
Chirální selektor na bázi polysacharidů může být potažen tzv. coated nebo imobilizován na částice oxidu křemičitého, což může ovlivnit selektivitu, a to buď přímo změnou interakce s fází, nebo nepřímo použitím různých dostupných rozpouštědel, pokud používáte imobilizovanou fázi místo coated fáze.
Většina chirálních stacionárních fází na bázi polysacharidů je coated, což znamená, že stacionární fáze není kovalentně navázána na podkladový oxid křemičitý. Řada chirálních selektorů byla v posledních letech imobilizována na částice oxidu křemičitého, což znamená, že jsou kovalentně spojeny a odvozují větší stabilitu v širším rozsahu agresivnějších rozpouštědel. Schopnost používat rozšířenou škálu rozpouštědel zvýšila možnosti selektivity těchto chirálních selektorů a níže uvádíme několik tipů, jak maximalizovat chirální selektivitu pomocí imobilizovaných stacionárních fází polysacharidu.
S imobilizovanou fází máte během vývoje metody k dispozici širší škálu organických rozpouštědel, což vám umožní vyřešit notoricky známé problematické enantiomery použitím silnějších organických rozpouštědel.
Zde je dosaženo základního rozlišení ornidazolu na imobilizované fázi Cellulose-5 přidáním MtBe do mobilní fáze a tato kombinace vykazuje větší rozlišení ve srovnání s potaženou fází Cellulose-1.
| Chirální separace ornidazolu na Lux 5 µm i-Cellulose-5 | |||
|---|---|---|---|
| Kolona | Lux 5 µm i-Cellulose-5, LC kolona, ea. | ||
| Rozměry | 250 x 4,6 mm ID | ||
| Kat. číslo | 00G-4756-E0 | ||
| Typ eluce | isokratická | ||
| Eluent A | 0,1% ethylaminu v MtBE | ||
| Průtok | 1 mL/min | ||
| Teplota kolony | okolní | ||
| Detekce | UV-Vis abs.-variabilní vl. (UV) @ 254 nm (okolní) | ||
| Ornidazole na Lux 5 µm Cellulose-1 v NP | |||
|---|---|---|---|
| Kolona | Lux 5 µm Cellulose-1, LC kolona, ea. | ||
| Rozměry | 250 x 4,6 mm ID | ||
| Kat. číslo | 00G-4459-E0 | ||
| Typ eluce | isokratická | ||
| Eluent A | hexan/etOH (80:20) DEA (0,1%) | ||
| Průtok | 1 mL/min | ||
| Teplota kolony | okolní | ||
| Detekce | UV-Vis abs.-variabilní vl. (UV) při 220 nm (okolní) | ||
Nástřik pomocí silných organických rozpouštědel:
Mnoho aplikací vyžaduje pro nástřik použití silného organického rozpouštědla - s potaženou fází to může vést k disoluci stacionární fáze a ztrátě selektivity. S imobilizovanou fází nedojde k žádnému poškození a selektivita je udržována po celou dobu životnosti kolony. Tady nevidíme žádnou změnu rozlišení, když se použije imobilizovaná fáze, dokonce i s DMSO.
| Podmínky pro všechny kolony | |||
|---|---|---|---|
| Kolona | Lux 5 µm i-Cellulose-5 | ||
| Rozměry | 250 x 4,6 mm ID | ||
| Kat. číslo | 00G-4756-E0 | ||
| Mobilní fáze | methanol/DEA (100: 0,1) | ||
| Průtok | 1,5 ml/min | ||
| Detekce | UV @ 280 nm | ||
| Teplota | 27 °C | ||
| Vzorek | Laudanosin | ||
| Ředicí rozpouštědlo | Dimethylsulfoxid (DMSO) | ||
V souhrnu s polysacharidovými chirálními stacionárními fázemi máte k dispozici široké chirální rozpoznávání a obrovské permutace systémů s mobilní fází a selektivitu. To může pomoci zajistit dobré enantiomerní rozlišení téměř všech chirálních molekul, když je proveden metodický a důkladný screeningový proces.
