Suggerimento Tecnico per la Preparazione del Campione
Livello: Base
Quanto campione posso caricare sul sorbente SPE? La quantità è legata alla concentrazione dell’analita di mio interesse?
Quando si considera la massa di fase stazionaria necessaria per eseguire un'estrazione in fase solida è fondamentale considerare la matrice del campione (siero, plasma, urina, saliva, cibo, acqua di fiume, suolo ecc.). Queste informazioni permetteranno, con l'uso di una tabella di ricerca adatta, di stabilire la massa di sorbente SPE da utilizzare. Le tabelle sono elaborate tenendo presenti i livelli relativi di materiale endogeno interferente presente nei campioni. Il dispositivo SPE deve essere capace di trattenere tutti gli analiti di interesse insieme a qualsiasi materiale endogeno che possa interagire con il sorbente, con lo stesso meccanismo di interazione dell’analita. Se il sorbente è insufficiente, è possibile che alcuni analiti possano non essere ritenuti attraverso il dispositivo SPE durante il caricamento del campione, con la conseguenza di minori recuperi e/o recuperi non omogenei tra i campioni.
Volume del Campione
Determina la massa del letto/ i volumi di solvente
| Fase Strata | Massa del Sorbente | Plasma/ Siero/ Sangue | Urina | Saliva | Tessuti omoggenati | Acuqa (Senza particolati) | Alimenti/piante | Suolo |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Materiali Polimerici | ||||||||
| X, X-C, X-CW, X-A, X-AW | 10 mg | 100 µL | 250 µL | 250 µL | 20 mg | 20 mL | 100 mg | 2 g |
| 30 mg | 250 µL | 1 mL | 1 mL | 50 mg | 60 mL | 300 mg | 6 g | |
| 60 mg | 500 µL | 2 mL | 2 mL | 100 mg | 120 mL | 600 mg | 12 g | |
| 100 mg | 1 mL | 4 mL | 4 mL | 200 mg | 200 mL | 1 g | 20 g | |
| 200 mg | 2 mL | 8 mL | 350 mg | 400 mL | 2 g | 40 g | ||
| 500 mg | 5 mL | 20 mL | 1 g | 1 L | 5 g | 100 g | ||
| 1 g | 2 g | 2 L | 10 g | 200 g | ||||
| 2 g | 4 g | 4 L | 20 g | 400 g | ||||
| Silice | ||||||||
| Si-1, C18-E, C18-U, C8, NH2, etc. | 25 mg | 100 µL | 250 µL | 250 µL | 20 mL | 25 mL | 125 mg | 2.5 g |
| 50 mg | 250 µL | 500 µL | 500 µL | 50 mg | 50 mL | 250 mg | 5 g | |
| 100 mg | 500 µL | 2 mL | 2 mL | 100 mg | 100 mL | 500 mg | 10 g | |
| 200 mg | 1 mL | 4 mL | 4 mL | 200 mg | 200 mL | 1 g | 20 g | |
| 500 mg | 2 mL | 8 mL | 500 mg | 500 mL | 2.5 g | 50 g | ||
| 1 g | 5 mL | 20 mL | 1 g | 1 L | 5 g | 100 g | ||
| 2 g | 2 g | 2 L | 10 g | 200 g | ||||
| 5 g | 5 g | 5 L | 20 g | 500 g | ||||
| 10 g | 10 g | 50 g | ||||||
Capacità di carico generiche
Polimerico: 10 - 15% della massa totale | Silica: 5% della massa totale del letto
Se confrontiamo plasma e urina, possiamo caricare 500 μl di plasma su un assorbente polimerico da 60 mg come Strata™-X. Utilizzando lo stesso tubo SPE da 60 mg potrebbero essere caricati 2 ml di urina, indicando che l'urina contiene molto meno materiale endogeno del plasma.
Per tipologie di campione non inclusi nella tabella, si consiglia l'uso di capacità di carico generica, il 5% della massa assorbente per i materiali di silice o il 10-15% per i materiali polimerici. La differenza tra la capacità di carico di silice e polimero è dovuta alla superficie disponibile, che è più alta per i materiali polimerici e anche alla densità del ligando - l'intera superficie di un materiale polimerico è essenzialmente fase stazionaria, mentre su un materiale di silice solo la fase legata alla silice prende parte al meccanismo di estrazione per le estrazioni in fase inversa o di scambio ionico.
Marchi commerciali
Strata è un marchio di proprietà di Phenomenex.
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