Le differenze di polarità tra solvente e fase stazionaria sono spesso correlate a fenomeni di distorsione della forma del picco quando si lavora in modalita splitless, ma cosa significa questo concretamente e quali sono le cause?
Quando si fa una iniezione in GC, in genere, è presente un largo eccesso di solvente rispetto ad un numero relativamente piccolo di molecole di analita. In una situazione ideale, il solvente dovrebbe ricoprire la fase stazionaria, distribuendosi e depositando in maniera uniforme le molecole dell’analita sulla fase stazionaria. Invece, quando il solvente ha una polarità diversa rispetto alla fase stazionaria, tende a formare delle piccole goccioline invece di ricoprire uniformemente la fase, queste goccioline eluiscono spinte dal carrier gas, peggiorando quindi la situazione.
Effetti cromatografici associati a differenze di polarità tra fase e solvente:
- Picchi scodati, in special modo quelli vicini al picco solvente
- Picchi sdoppiati
- Picchi multipli per lo stesso analita
Soluzioni che possono essere adottate:
- Cambiare il solvente di eluizione, in modo che la polarità sia il più possibile vicina alla fase della colonna
- Ridurre il volume di iniezione
- Utilizzare un retention gap per limitare gli effetti causati dal solvente non uniformemente diffuso attraverso la fase, e fare in modo che le goccioline si trasferiscano in maniera più uniforme in colonna
Con Fasi a bassa polarità (100% dimetilpolisilossano, 5% fenildimetilpolisilossano) è opportuno scegliere solventi di iniezione a bassa polarità come l’esano. Per fasi a media polarità (50% fenildimetilpolisilossano, 6% cianopropilfenil etc) meglio usare solventi come l’etile acetato, infine fasi molto polari (polietilen glicole (WAX), o quelle ad alta % di cianopropilfenil) lavorano bene con metanolo. Se la solubilità dell’analita in un determinato solvente è critica, si può aggiungere per migliorare la situazione una piccola quantità di un solvente diverso (toluene o acetonitrile) in modo tale che la miscela ottenuta possa avere una polarità più simile alla fase stazionaria..
Conclusioni: Quando il solvente di iniezione utilizzato in modalità splitless ha una polarità molto più alta della fase stazionaria della Colonna, si possono verificare effetti negativi a livello cromatografico. Modificare il solvente di iniezione, ridurre il volume iniettato ed utilizzare un retention gap sono tutti possibili strategie da utilizzare per migliorare il cromatogramma.
