Technischer Tipp zur Probenvorbereitung
Niveau: Troubleshooting
Ich erhalte eine niedrige Wiederfindungsrate bei meiner SPE-Methode. Wie kann ich das Problem beheben?
Tipps in anderen Sprachen
Wenn Sie mit einer bekannten, guten Methode arbeiten, würden wir Ihnen empfehlen:
• Überprüfen Sie alle für die SPE-Methode verwendeten Lösungen, um sicherzustellen, dass nichts falsch etikettiert wurde usw.
• Überprüfen Sie den Prozess: War der Fluss während der Beladung oder Elution möglicherweise zu schnell? Ist die Kartusche zwischen der Äquilibrierung und dem Beladen der Probe trocken gelaufen?
Im Allgemeinen ist es am schnellsten, die Extraktion einfach zu wiederholen und dabei diese Punkte zu berücksichtigen.
Wenn Sie jedoch eine neue Methode entwickeln, ist es notwendig, den Analyten "aufzuspüren". Als Erstes empfehlen wir, eine Lösung des Analyten ohne Probenmatrix herzustellen (als ideale Probe zu verwenden). Führen Sie dann die Probenvorbereitungsmethode durch:
• Konditionierung der Kartusche
• Äquilibrieren der Kartusche
• Laden Sie die Probe und sammeln Sie den Durchfluss. Analysieren Sie diesen auf den Gehalt an Analyten. Wenn der Analyt in dieser Fraktion gefunden wird, deutet dies darauf hin:
○Das Lösungsmittel der Probe ist zu stark, oder der pH-Wert ist inkorrekt
○ Der Beladungsgeschwindigkeit ist zu hoch
○ Sie haben einen Durchbruch, weil entweder die Probenbeladung zu hoch oder die Sorbensmasse zu niedrig ist
Wenn der Analyt nicht in der Beladungsfraktion gefunden wird, fahren Sie mit dem Waschschritt fort
• Waschen Sie die Kartusche und behalten Sie die Waschfraktion zurück. Analysieren Sie erneut auf den Analytgehalt. Wenn Analyt in der Waschfraktion gefunden wird, deutet dies darauf hin:
○ Das Waschlösungsmittel ist zu stark
○ Das Waschlösungsmittel hat nicht den richtigen pH-Wert
• Wenn der Analyt weder in der Beladungs- noch in der Waschfraktion gefunden wurde, muss der Analyt auf der Kartusche zurückgehalten werden.
○ Versuchen Sie, ein stärkeres Elutionslösungsmittel zu verwenden.
○ Stellen Sie sicher, dass der pH-Wert des Elutionslösungsmittels korrekt ist
○ Wenn die ersten beiden Vorschläge nicht helfen, versuchen Sie, ein weniger retentives Sorbens zu verwenden (bei Umkehrphase versuchen Sie, eine C18-Kartusche durch eine C8-Kartusche zu ersetzen, wenn die Analyten sehr hydrophob sind).
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