Wskazówka techniczna dotycząca przygotowania próbki
Poziom: Podstawy
Przesuszenie kolumienek SPE na bazie krzemionki może prowadzić do słabego odzysku próbki
W przypadku większości kolumienek lub płytek SPE z odwróconą fazą stacjonarną wykorzystującą złoże na bazie krzemionki (np. te wykorzystujące Strata™ C18-E), są one początkowo kondycjonowane przy użyciu rozpuszczalnika organicznego, takiego jak metanol, a następnie płukane wodą lub buforem. Jeśli złoże SPE na bazie krzemionki zostanie pozostawione do wyschnięcia na dłuższy czas podczas tych etapów kondycjonowania, może wykazywać słabą retencję dla docelowych analitów, zwłaszcza jeśli związki docelowe mają charakter polarny. Dlatego ważne jest, aby użytkownicy SPE zwracali szczególną uwagę podczas tego kluczowego etapu kondycjonowania, aby uzyskać dokładne i powtarzalne wyniki.
Poniższy rysunek przedstawia dwie kolumienki Strata C18-T (1 gm/6 mL), na które zostało naniesione 4 mL niebieskiego barwnika (CuCl2). Wkład po lewej stronie (A) był najpierw kondycjonowany przy użyciu 12 ml metanolu, następnie suszony przez dziesięć minut pod wysoką próżnią (10" Hg), a następnie kondycjonowany 12 ml wody. Jak widać na rysunku, niebieski barwnik jest równomiernie rozłożony na złożu sorbentu. W przeciwieństwie do tego, wkład po prawej stronie (B) był kondycjonowany metanolem, a następnie natychmiast wodą bez suszenia. W tych warunkach niebieski barwnik jest widoczny jako wąskie, skupione pasmo na czele złoża sorbentu. Po elucji odzysk z wkładu B był znacznie większy niż odzysk z wkładu A (wkład wysuszony). Tę różnicę w odzysku można przypisać przede wszystkim słabej retencji barwnika z powodu wysuszenia złoża sorbentu.
Wskazówki dotyczące zapobiegania przypadkowemu przesuszeniu, aby zapobiec utracie analitu
• Nie dopuszczaj do wyschnięcia złoża na żadnym etapie (chyba że jest to wyraźnie wskazane w metodzie).
• Używaj przepływu grawitacyjnego jako alternatywy dla podciśnienia, aby zapobiec nadmiernemu wysuszeniu.
• Wirować z niską prędkością (np. 500 obr./min) lub stosować nadciśnienie.
• Przejście metodę na równoważny sorbent polimerowy, taki jak Strata-X, który nie wykazuje zmian w retencji i odzysku z powodu okresowego suszenia.
A. Sorbent krzemionkowy C18 wysuszony po kondycjonowaniu metanolem
B. Sorbent krzemionkowy C18 kondycjonowany bez suszenia
Znaki towarowe
Strata jest znakiem towarowym firmy Phenomenex.
Phenomenex is a technology leader committed to developing novel analytical chemistry solutions that solve the separation and purification challenges of researchers worldwide.
CONNECT WITH US
